白介素elisa试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白介素水平。用纯化的人白介素抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白介素，再与HRP标记的白介素抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过洗涤后加底物TMB显色。

 

　　白介素elisa试剂盒的计算：

　　以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标， 在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

　　试剂盒性能：

　　1、样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。

　　2、批内与批见应分别小于9%和11%。

 

　　血清elisa试剂盒的操作流程如下：

　　1、血清总补体ELISA试剂盒待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。

　　2、酶标板置4℃，包被过夜。

　　3、洗板：吸干孔内反应液，产品仅用于科研用洗涤液过洗一遍，之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。

　　4、阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。

　　5、酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。

　　6、洗板，同(4)。

　　7、每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。

　　8、酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。

　　9、洗板，同(4)。

　　10、每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。

　　11、每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。

　　12、分别测450nm吸光值W1和630nm吸光值W2，最终测得的OD值为两者之差(W1-W2)，以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。

　　13、数据处理：在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。